Bagaimana menilai kesan anti-acuan agen anti-acuan kulit?
Penilaian kesan antijamur pada agen antijamur kulit umumnya merangkumi dua aspek. Di satu pihak, pengesanan keberkesanan agen antijamur, tujuan utamanya adalah untuk menentukan sama ada ubat tersebut mempunyai keupayaan untuk menghalang atau membunuh acuan.
Kaedah penilaian yang biasa digunakan meliputi: kaedah zon penghambatan, kaedah penuangan plat, kaedah bakteria tempat, kaedah kultur pencairan, kaedah penyebaran, penentuan kepekatan perencatan minimum (MIC), dll .; sebaliknya, kesan antijamur setelah menambahkan perencat cendawan pada kulit Kaedah penilaian makmal yang biasa digunakan meliputi: kaedah zon penghambatan, kaedah pendedahan semula jadi, kaedah penggantungan bilik basah, kaedah penguburan tanah, kaedah medium, dan sejenisnya.
Pada masa ini, kaedah penilaian makmal yang sering digunakan oleh penyamak adalah seperti berikut.
(1) kaedah zon perencatan
Menggunakan kertas bulat atau kulit bulat (umumnya berdiameter 2 hingga 4 cm), direndam atau diputar dalam kepekatan larutan agen anti-acuan tertentu untuk jangka masa tertentu, dan kemudian dilekatkan pada budaya pelapisan sejumlah penggantungan spora acuan Pusatkan piring, kemudian inkubasi untuk jangka masa pada suhu (28 ± 1) ° C, kelembapan relatif ≥ 95%, perhatikan kehadiran atau ketiadaan zon perencatan lutsinar di sekitar kertas bulat atau kulit bulat , atau gunakan caliper Vernier untuk mengukur diameter lingkaran cendawan. Kaedah zon perencatan hanya kaedah kualitatif atau separa kuantitatif, dan ukuran zon perencatan dipengaruhi oleh kemampuan perencat acuan untuk merebak pada plat agar (dengan sifat perencat acuan, pelarut perencat acuan larut dalam perencat acuan) Jenisnya, komposisi medium, penyebaran agen antijamur pada kulit, dan keadaan kultur sangat terjejas, dan dengan itu kesan rujukannya terhad. Walau bagaimanapun, kaedah ini juga mempunyai kelebihan operasi mudah, yang dapat dikenali dengan mata kasar, penglihatan yang baik, dan sejenisnya, dan sering digunakan untuk penilaian awal kesan tahan lendir dari perencat acuan.
(2) Kaedah kepekatan perencatan minimum (MIC)
Inhibitor cendawan ujian diformulasikan ke dalam rangkaian kepekatan, dan kemudian 1 mL dikeluarkan secara aseptik, ditambahkan ke dalam piring kultur yang disterilkan, dan kemudian 1 mL suspensi bakteria ujian disuntikkan ke dalam setiap piring kultur (atau oleh gelung inokulasi) penggantungan regangan ujian dilekatkan pada plat medium agar yang racun kulat ditambahkan dan dipadatkan, dan akhirnya, media agar 40 ° C. yang telah ditentukan disuntik ke dalam setiap piring kultur, dan dicampur dan dibekukan secara seragam. Ia ditempatkan di lingkungan dengan suhu (28 ± 1) ° C dan kelembapan relatif ≥ 95% untuk jangka waktu (umumnya 3 hingga 5 hari), dan kepekatan terendah spesies ujian dapat diperiksa dan dibandingkan. Kaedah MIC adalah kaedah kuantitatif, yang lebih baik dapat mencerminkan keperitan agen anti-kulat dan memudahkan perbandingan kesan anti-cendawan antara agen anti-kulat yang berbeza. Ini adalah salah satu kaedah penyataan virulensi yang paling biasa digunakan. Walau bagaimanapun, terdapat banyak faktor yang mempengaruhi nilai MIC, seperti sumber regangan ujian, jumlah inokulum, bilangan spora acuan dalam suspensi spora acuan, medium, jenis pelarut di mana perencat acuan dilarutkan, keadaan budaya, dan lain-lain, jadi MIC inhibitor acuan harus dijalankan dalam keadaan yang sama
(3) Kaedah penggantungan ruang basah
Kulit yang dirawat ejen anti-acuan (biasanya persegi panjang 2.5 cm × 5.0 cm) disembur di permukaan kulit dengan semburan acuan untuk penggantungan spora, dan kemudian digantung di ruang suhu dan kelembapan yang tetap. Suhu (28 ± 1) ° C, kelembapan relatif ≥ 95%] dikultur selama 28 hari, dan keadaan cendawan diperhatikan secara berkala, dan kesan cendawan perencat cendawan dinilai oleh keadaan kulit cendawan yang panjang.
Strain yang diuji secara amnya adalah Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Penicillium citrinum, Penicillium fuliginea dan Trichoderma. Kaedah pengukuran ini adalah ujian dipercepat yang mensimulasikan lingkungan semula jadi. Rintangan acuan sampel adalah 0 atau 1 gred, dan yang lain tidak memenuhi syarat. Setiap kaedah ini mempunyai kelebihan dan kekurangannya sendiri. Untuk agen anti-acuan yang sama, kaedah penilaian yang berbeza boleh digunakan. Hasilnya mungkin tidak sama. Walaupun kaedah yang sama digunakan, hasilnya akan berbeza kerana keadaan yang berbeza seperti masa, tempat dan penguji. Perbezaan. Oleh itu, kaedah ujian mempercepat makmal ini hanya mempunyai nilai rujukan tertentu, dan prestasi aplikasi sebenar agen antijamur juga mesti disahkan dengan aplikasi praktikal.
